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激光you导荧光产sheng的原理

2012-3-5

由荧光的fa光原理ke知,分子荧光光谱与激fa光yuan的波长无关,只与荧光物质本身的neng级结构有关,所以,ke以根ju荧光谱xian对荧光物质进xing定xing分析jian别。 照射光越强,被激fa到激fa态的分子shu越多,因而产sheng的荧光强度越强,测量时灵敏度越高。一般由激光you导荧光测量物质的texing比由一般光yuanyou导荧光所测的灵敏度提高2-10倍。

当紫外光或波长较短的ke见光照射到某些物质时,这些物质会fa射出各zhong颜色和不同强度的ke见光,而当光yuan停止照射时,这zhong光xian随之xiaoshi。这zhong在激fa光you导下产sheng的光称wei荧光,nengfa出荧光的物质称wei荧光物质。

荧光分光光度计基本结构

1. yangpinshi:tong常由石英池(液体yangpin用)或固体yangpinjia(粉末或片状yangpin)组成。测量液体时,光yuan与检测器成直角安排;测量固体时,光yuan与检测器成锐角安排。

2.激fa单色器:置于光yuan和yangpinshi之间的wei激fa单色器或第一单色器,筛选出te定的激fa光谱。

3.fa射单色器:置于yangpinshi和检测器之间的weifa射单色器或第er单色器,常采用光栅wei单色器。筛选出te定的fa射光谱。

4. 光yuan:wei高压汞蒸气灯或xian弧灯,后者nengfa射出强度较da的连续光谱,且在300nm~400nm fan围na强度ji乎xiangdeng,故较常用。

5. 检测器:一般用光电guan或光电倍增guanzuo检测器。ke将光信号放da并转wei电信号。

分子的吸收光谱和产sheng荧光的jizhi:当物质分子吸收某些tezheng频率的光子以后,ke由基态yueqianzhi第一或第er电子激fa态中各个不同振动neng级和各个不同转动neng级。处于激fa态的分子tong过无辐射chiyu(例如,与其它分子peng撞过程中xiao耗neng量,或者,对分子组织而言,youfa光化fanying而xiao耗neng量deng)降落zhi第一电子激fa态的zui低振动neng级,然后再由这个zui低振动neng级以辐射chiyu的形式yueqian到基态中各个不同的振动neng级,fa出分子荧光。然后再无辐射chiyuzhi基态中zui低振动neng级。

ji乎所有物质分子都有吸收光谱,但不是所有物质都会fa荧光。产sheng荧光bi须具备以下条件:

① 吸收了与本身tezheng频率xiang同的neng量之后的物质分子,bi须具有高的荧光效率。许多吸光物质并不产sheng荧光,主要是因wei它们将所吸收neng量xiao耗于与溶ji分子或其它分子之间的xiang互peng撞中,还kenengxiao耗于一次光化xuefanying中,因而无法fa射荧光,即荧光效率很低。

②该物质分子bi须具有与所照射的光xianxiang同的频率,这与分子的结构miqiexiang关

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